一种同时针对芥蓝同一基因家族多个成员突变体的高效制备方法
发布时间:2021-06-15
专利号:2018100300818
专利类型:发明专利
专利权人:四川农业大学
发明人:孙勃;张芬;郑爱红;汤浩茹;薛生玲;江雷雨;袁巧;江敏;陈清;张勇;罗娅;王小蓉;王燕;刘泽静;李梦瑶
简介:
本发明提供了一种同时针对芥蓝同一基因家族多个成员突变体的高效制备方法,包括以下步骤:根据芥蓝基因家族各成员的CDS全长,分析其各成员的靶位点,筛选共同靶序列;根据选定的靶序列,构建CRISPR/Cas9表达载体,然后转化农杆菌感受态,浸染外植体,再对外植体进行组织培养,获得突变植株。本发明通过一次转化同时敲除芥蓝植物体内同一基因家族的多个基因,可得到大量的不同成员突变的突变体材料,提高了突变的效率,节省了工作量,节约了工作时间,解决了以往基因家族突变为获得不同的单突和多突材料,需分别设计多个载体,各载体需进行单独转化,同时诱导时间长和难度大等问题,进而体现了本发明同时、高效的优势。