一种豇豆叶片ＤＮＡ的高盐乙醇提取方法
发布时间：2021-06-15
专利号：2016107105978
专利类型：发明专利
专利权人：四川农业大学
发明人：谭华强;李焕秀;唐懿;赖云松;郑阳霞;秦耀国;铁曼曼;孙国超;黄海涛;谢永东
简介：
本发明提供一种豇豆叶片ＤＮＡ高盐乙醇提取方法，包括如下步骤：（１）采用ＤＮＡ提取液裂解液氮研磨好的豇豆叶片，于６０℃水浴６０ｍｉｎ；（２）取混合溶液离心，取上清液，加入ＣＴＡＢ沉淀缓冲液进行沉淀；（３）沉淀反应后离心，弃掉上清液，取沉淀物，向其中加入高盐ＴＥ缓冲液，于４２℃水浴１５ｍｉｎ；（４）加入无水乙醇进行沉淀，离心，弃上清液，用８０％的乙醇溶液清洗沉淀物；（５）沉淀物离心，弃上清液，剩余物干燥后加入ＴＥ溶液，４２℃水浴２０?３０ｍｉｎ，离心，取２／３上清液，４℃冰箱保存。本发明的方法使用安全、成本低廉，不使用毒性强的有机试剂，ＤＮＡ提取效率高，整个提取过程可以３小时内完成，提取到的豇豆叶片ＤＮＡ含量高，质量好，可用于酶切以及下游的ＰＣＲ扩增。
