非洲猪瘟快速检测技术
发布时间：2021-06-19
技术领域：养殖业
技术概述：（一）技术基本情况 非洲猪瘟（African swine fever, ASF）是由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病。急性病例的发病率和死亡率几乎达 100%。世界动物卫生组织（OIE）将 ASF 列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。我国于 2018 年 8 月 3 日辽宁发生第一起非洲猪瘟疫情，该疫情迅速在全国蔓延，给我国生猪3造成巨大损失，同时也对人民“菜篮子”供应保障带来巨大挑战。 非洲猪瘟自上世纪初首次在肯尼亚报道以来，目前已在世界上存在超过了 100 年，但由于一直缺乏有效的疫苗，所以对该病的预防一直采取的是扑杀以及综合性的生物安全措施。在对该病的检测诊断上，根据世界动物卫生组织（OIE）的建议，对抗原的检测采用红细胞吸附、免疫荧光以及PCR 的方法，而这些方法均需要固定实验室以及昂贵的设备，难以在现场实现检测。因此急需研发和推广现场快速、准确、特异的检测方法。环介导等温扩增技术（LAMP）和实时荧光定量 PCR 快速检测技术，适合现场快速早期诊断，该技术操作简便，快速，肉眼或便携设备判定结果，适合基层兽医站、规模化猪场、屠宰场和食品加工企业等使用。 非洲猪瘟病毒快速检测技术的研发和推广应用，能有效的解决如下几个问题：1、非洲猪瘟快速检测技术不需要专业的实验室和大型设备，规模化生猪养殖场、屠宰企业等实验室即可应用检测；2、检测时间短，1 小时内完成检测工作；3、操作简便，操作人员经过简单培训即可完成检测工作。 （二）技术示范推广情况 非洲猪瘟快速检测技术在京津冀三省市动物疫控系统以及规模化生猪养殖企业进行示范应用。 （三）技术获奖情况 1、非洲猪瘟病毒 LAMP 荧光检测试剂盒和非洲猪瘟病毒荧光 PCR 快速检测试剂盒已经通过农业农村部畜牧兽医局组织的专家评审，被列入非洲猪瘟现场快速检测试剂名单。 2、核心技术已经申报国家发明专利 1 项，申请号为 201910698248.2。 3、检测设备经中国食品药品检定研究院检测，符合产品技术要求。 （四）增产增效情况 非洲猪瘟病毒LAMP荧光检测试剂盒和非洲猪瘟病毒荧光PCR快速检测试剂盒已经被农业农村部畜牧兽医局推荐为非洲猪瘟现场快速检测试剂，具有操作简便、快速、准确、适合现场检测等优势，能够节省检测成本，提高检测效率，有效降低企业经济损失，增加企业效益。
技术要点：
设计和筛选针对非洲猪瘟病毒的特异性引物以及优化反应条件是该技术的关键所在。主要技术内容包括引物的设计、引物的合成和筛选、反应体系的建立与优化、方法敏感性、特异性、重复性实验、检测方法的比对评估实验、临床样品的检测实验。
适宜区域：适合规模化养殖场、基层兽医实验室、屠宰场、食品生产企业等进行推广应用。
注意事项：在技术推广应用过程中需要特别注意防止扩增产物的污染，避免产生假阳性结果。
支撑单位：（一）北京市动物疫病预防控制中心 （二）中联瑞（北京）生物科技有限公司 （三）卡尤迪生物科技（北京）有限公司
联系人：（一）北京市动物疫病预防控制中心 联系地址：北京市大兴区祥瑞大街 19 号 邮政编码：102629 联 系 人：王林 联系电话：15210715635 电子信箱：Lwang0631@163.com （二）中联瑞（北京）生物科技有限公司 联系地址：北京市顺义区仁和镇仁和园二街 4 号院 5 号楼 5-101 邮政编码：101300 联 系 人：陈莉丽 联系电话：13121872816 电子信箱：lanborui0026@vip.163.com （三）卡尤迪生物科技（北京）有限公司 联系地址：北京市海淀区创业中路 36 号五层 509、510 室 邮政编码：100085 联 系 人：臧越鹏 联系电话：13810304395 电子信箱：zangyp@coyotebio.com
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