奶山羊鲜胚移植技术
发布时间：2021-06-15
技术领域：养殖业
技术概述：提高优质高产奶山羊母羊的繁殖效率。
技术要点：
（ 1）供体羊的选择与饲养管理 ①供体羊的选择。供体羊品种优良，系谱清楚，遗传性能稳 定，生产性能突出；体质健康，无传染性疾病，繁殖机能正常； 体重 60 公斤左右，泌乳期产奶量超过 800 公斤，经产 1～ 3 胎， 产后 90 天以上的母羊作为供体。 ②供体羊饲养管理。从国外进口的奶山羊繁殖 1 胎后可作为 供体，从国内引进的经产羊在应激过后的 6 个月后方可作为供体。 饲养环境稳定，舍内温度一般可控制在 10-26 度，圈舍卫生、干—43— 燥。根据膘情调整饲料配方，保持中等膘情以上，自由采食、饮 水。 （ 2）供体羊超数排卵和人工授精 ①超数排卵 ——超数排卵所用激素。超数排卵应在奶山羊繁殖最佳季节 进行，一般为 9-11 月。可选用进口或国产的垂体促卵泡激素 (FSH)，氯前列烯醇(pGF2a 类似物)，促黄体素释放激素 A3 （ LHRH-A3，促排 3 号）。 ——激素剂量。按照说明使用。 ——超排程序。供体母羊阴道内放置羊用 CIRD 阴道栓作为 处理第 0 天，肌肉注射氯前列烯醇，第 16 天肌肉注射 FSH，每 天早晚间隔 12h 注射 1 次 FSH，连续 3～ 4 天，剂量依次递减。 在注射 FSH 最后 1 次的同时，肌肉注射氯前列烯醇，撤去除阴道 栓观察发情，进入配种程序，同时注射促排 3 号；未发情羊注射 FSH， PGF2a。 ②供体羊发情鉴定。在撤除阴道栓后的 12～ 72h，对超排供 体羊进行发情观察。当有明显的爬跨反应，以及阴道流粘液等症 状出现时，利用公羊对母羊进行接受爬跨的试情检查，以站立接 受公羊爬跨作为发情开始的标准，并及时纪录发情起止时间。 ③配种和人工授精操作。要求配种公羊，无传染病，品种优 良，遗传稳定， 生产性能突出。经后裔测定等综合评定等级为特 级。配种前检查精液质量，精液质量符合 GB4143—84 的规定。—44— ④配种或人工授精。最好选择本交进行配种，也可以进行人 工授精。实行人工授精操作时要求输精器械保持清洁无菌，并对 母羊外阴清洗消毒。利用鲜精人工授精时，每次输入的有效精子 数不低于 1.0× 108 个。如果采取人工授精，每间隔 8h 输精一次， 直到停止发情为止，适宜的输精次数为 3～ 5 次。 ⑤腹腔镜子宫输精。利用鲜精输精时，可在供体羊撤栓后的 36～ 48 小时，借助腹腔镜观察母羊子宫卵巢发育情况，在子宫 两侧子宫角大弯处，用腹腔输精枪分别输精 1 次，注入精液 0.1ml， 有效精子数不低于 5000 万个。 利用冻精输精时，可在供体羊撤栓后的 30～ 36 小时，用腹 腔输精枪分别输精 2 次，注入精液 0.2ml，有效精子数不低于 1000 万个，间隔 8-12 小时再输精一次。 （ 3）胚胎的采集 ①药品、试剂器械 ——器材：手术台、剃毛刀、创布、止血纱布、剪毛剪、手 术刀柄、手术剪、止血钳、巾帕钳、持针器、肠钳(带乳胶管）、 手术刀片、缝合针、镊子、 120 mm 表面皿、头皮针（尖端磨钝）、 8mm 硅胶管双路通管、螺旋回收针、 10mL 注射器、 20mL 注射器、 8mm 玻璃管和 5mm 培养皿等。 ②冲胚所需药品。杜氏磷酸盐缓冲液(PBS)、胚胎培养液、 75%酒精、碘酊、新洁尔灭、 0.9%生理盐水、兽用麻醉药和解麻 药等。—45— ③供体羊手术与胚胎回收。手术前空腹 24 h，按照说明注 射兽用麻醉药后，将母羊仰卧保定。选择在乳房正中与大腿内侧 鼠蹊部作为手术部位，剃除手术部位的羊毛（ 20 cm× 20 cm）。 清洗消毒后，固定手术创布。避开血管，纵向切开 3 cm-5 cm 长 的创口，将皮下结缔组织分离，再用刀柄后端将肌肉层和腹膜钝 性分开，轻轻拉出子宫和卵巢，观察和记录两侧卵巢黄体和卵泡 数。供体羊首次配种后的 132～ 144h（ 5.5～ 6d），从双侧子宫角 回收桑葚胚和囊胚。胚胎回收时可用长柄肠钳（齿槽外套乳胶管） 夹于子宫角基部，将子宫角胚胎回收专用管头端植入子宫腔内， 尾端贴于集胚杯的内壁，拉直宫管结合部，用连有 12 号针头的 注射器吸取 30ml 专用冲胚液，刺入宫管结合部进行冲胚，将含 有胚胎的冲胚液回收到专用集胚杯内。冲胚完毕后，用 37℃的 生理盐水将子宫及卵巢冲洗干净以后，再给腹腔注入适量抗菌素 预防感染。供体母羊创口采用两层缝合法缝合，其中腹膜连同肌 肉进行缝合,皮肤进行节结缝合，针痛间距 1cm。 （ 4）胚胎的质量鉴定 ①胚胎的收集。胚胎检测无菌室的室温一般要求控制在 20-25℃，采用体式显微镜在集胚杯中仔细查找并收集胚胎。将 检出的胚胎收集到盛有保存液的培养皿中。检出后的胚胎用保存 液冲洗 3～ 4 次后再进行质量鉴定。 ②胚胎质量鉴定。根据卵裂球的发育质量和整个胚胎的形态 结构，可将胚胎分为 A、 B、 C、 D 四个等级。—46— A 级：胚胎发育阶段与胚龄相吻合，透明带完整，卵裂球均 匀紧凑，轮廓清楚，透明度好，饱和充盈于透明带内，整个胚胎 呈球形； B 级：胚胎发育阶段与胚龄相符，卵裂球均匀紧凑，透明度 好，无畸形； C 级：胚胎发育阶段与胚龄相符，透明带畸形或部分缺失， 卵裂球轮廓不清楚，细胞分散，色泽过暗或过淡； D 级：胚胎发育阶段与胚龄相符，卵裂球已分散开或细胞已 破裂，失去了继续发育的潜力。 A、 B 级胚胎可用于冷冻保存； A、 B、 C 级胚胎可用于鲜胚移 植； D 级为不可用胚胎移植。 （ 5）受体羊的选择与饲养管理 ①受体羊的选择。选择健康无病，体况中等偏上，年龄在 2～ 4 胎的中低产经产奶山羊（产后 90 天以上）作为受体羊。严禁 用患有布鲁氏杆菌病、子宫内膜炎、阴道炎、卵巢囊肿、乳房炎、 发情周期不正常个体作为受体羊。 ②受体羊的饲养管理。受体羊统一打号、建档、专人饲养管 理，保持饲养管理稳定，避免各种应激反应，同时做好预防注射 和体内外寄生虫的驱虫工作。每日每只受体羊饲喂精料不少于 0.5kg，自由采食，日喂 2 次，满足清洁饮水。保持中等以上体 况，严禁与公羊混群饲养。 （ 6）胚胎移植—47— ①受体羊同期发情处理。见附表 A。 ②受体羊发情鉴定。从撤除阴道栓后的 12-36h 开始，观察 受体羊发情情况，每天严格记录发情 4 次。 ③胚胎移植。受体羊在发情后 5～ 6 天之间进行胚胎移植， 移植方法如下： ——受体羊手术前 24h 禁食，术前 12h 禁水； ——受体羊术前肌肉注射兽用麻醉剂； ——受体羊术前保定及备皮，将麻醉后的母羊仰卧保定于前 低后高的专用手术架，在乳房基部沿腹中线向前及两侧约 12cm × 12cm 区域处进行剃毛，清洗消毒后，固定手术创布。 ——用套管针在腹中线两侧分别刺入腹腔开孔，将腹腔镜经 套管插入腹腔右孔，通过目镜观察受体羊的卵巢、黄体发育情况， 通过左孔用子宫钳夹出黄体发育好一侧的子宫角轻轻拉出腹腔， 在子宫角前端的 1/3 处避开血管扎孔，将装有胚胎的移植针从此 针眼进入子宫腔注入胚胎，子宫送入腹腔，缝合创口。 ——术后护理，无感染羊一周后拆线，感染羊进行外科消毒 处理。 ——妊娠诊断，术后受体羊 45～ 60d 采用 B 超进行怀孕诊断。 ④妊娠羊的饲养管理。对已妊娠羊加强饲养管理，严禁饲喂 发霉变质饲料和冰冻饲料，注意防寒保暖，减少应激，同时做好 布病和衣原体病的检测及净化工作，防止流产。
适宜区域：该配套技术适宜在全省乃至全国奶山羊养殖区推广应用。
注意事项：
支撑单位：陕西省奶山羊产业技术体系、西北农林科技大学陕西省奶山羊养殖工程技术中心
联系人：联系人：安小鹏 联系电话： 13474687936 电子邮箱： anxiaopengdky@166.com
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备注信息：陕西省2020年主推技术
